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CN1478789A      一种核糖核酸的制备方法

失效
期限届满

申请日：2003.06.19

IPC分类号：C07H21/02

公开日：20040303

申请人：威世药业(如皋)有限公司

发明人：张永深;张燕军

专利详情
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发明名称

一种核糖核酸的制备方法

摘要

本发明涉及一种核糖核酸的制备方法，该方法对现有技术作出了多方面的改进。因此，该方法不但提高了RNA生产效率，而且还能保证产品的质量和得率，显著地降低了生产成本，大大提高了经济效益。

著录项目

申请号：CN03137647.9

公开（公告）号：CN1478789A

申请日：2003.06.19

公开（公告）日：20040303

优先权：

同族：中国

同族引用文献：0

同族施引专利：1

相关人

申请人：威世药业(如皋)有限公司

申请人地址：226500 江苏省如皋市普庆路139号

权利人：威世药业(如皋)有限公司

权利人地址：226500 江苏省如皋市普庆路139号

发明人：张永深;张燕军

代理机构：北京路浩知识产权代理有限公司

代理人：向华

权利要求
    1、一种核糖核酸的生产方法，其特征在于该方法包括下述步骤： (1)匀浆：取100重量份动物肝，用水洗净，沥干，用绞肉机绞碎猪肝，猪肝与SSC(pH7.0)溶液以体积/重量计按比例1∶0.8-2.2搅拌混合，胶体磨匀浆，料液离心分离，取上清液，过滤得到70-210体积份的滤液； (2)取步骤(1)的滤液，加入7-21体积份SDS溶液，搅拌，再加入23-100体积份80-90％苯酚溶液，再搅拌，再加入23-100体积份氯仿，搅拌，料液离心分离，回收上清液； (3)取步骤(2)的上清液，加入5-20体积份20％乙酸钾溶液，混匀，再加入80-420体积份乙醇，至乙醇浓度为70％，混匀，自然沉降，离心分离得到得沉淀物； (4)用12体积份复溶液溶解步骤(3)的沉淀物，再加入2-11体积份80％苯酚，搅拌，再加入2-11体积份氯仿，搅拌，再离心分离，回收取上清液； (5)取18体积份的步骤(4)的上清液，加入1.8-12体积份80％苯酚，搅拌，再加入1.8-12体积份氯仿，搅拌，离心分离，回收取上清液； (6)取步骤(5)上清液，加入2-14体积份氯仿，搅拌，离心分离，回收取上清液； (7)往步骤(6)的上清液，加入95％乙醇至乙醇浓度为70％，混匀，自然沉淀，倾去上清液，离心分离得RNA粗品； (8)用13体积份K2HPO4溶液溶解上述RNA粗品得到溶解液，然后加入5-10乙二醇甲醚，离心得到上清液； (9)取步骤(8)上清液，再加入5-8体积份乙酸钠溶液，混匀，然后再加入2-4.5体积份加入CTAB溶液，混匀，沉淀，离心，得到沉淀物； (10)取步骤(9)的沉淀物，用10体积份的乙酸钠溶液溶解，再加入95％乙醇至浓度为70％，弃去上清液，沉淀离心分离，重复该步骤3-4次，这样得到本发明的RNA产品， 其中：所述的SSC溶液(pH＝7.0)是用5.85克氯化钠、14.7克柠檬酸钠、5克皂土加纯化水至1升后，再用冰醋酸调节到pH＝7.0制备得到的； 所述的SDS溶液(pH＝9.0)是用50克SDS、133毫升TEA、4.0克EDTA加纯水至1升后，再用冰醋酸调节到pH＝9.0制备得到的； 所述的80％苯酚溶液是将800毫升苯酚和1克8-羟基喹啉用纯水溶解至1升得到的； 所述的乙酸钠复溶液是用13.6克乙酸钠、5.0克SDS、13.3毫升TEA、0.8克EDTA加纯化水至1升后，再用冰醋酸调节到pH＝7.0制备得到的； 所述的乙酸钠溶液是用13.6克乙酸钠、0.8克EDTA加纯化水至1升后，再用冰醋酸调节到pH＝7.0制备得到的； 所述的K2HPO4溶液是用注射用水溶解296.7克K2HPO4.H2O和0.8克EDTA，再用磷酸调节到pH＝8.0制备得到的； 所述的CTBA溶液是用注射用水溶解30克CTBA，再用水调至1升制备得到的。
法律信息概述
失效
期限届满
2023.07.07
失效
2005.07.27
授权
2004.03.03
申请局首次公开
2003.06.19
授权